١- Calcitriol (١,٢۵ dihydroxy-vitamin D) و Calcifidiol (٢۵-hydroxy-vitamin D):
نقش اصلی ویتامین D، کمک به تنظیم جذب کلسیم، فسفر و (به میزان کمتر) منیزیم است. ویتامین D برای رشد و سلامت استخوانها حیاتی است و بدون آن، استخوان ها نرم و ناقص خواهند شد و قادر به تعمیر خود به طور طبیعی نخواهند بود، در نتیجه باعث دو نوع بیماری نرمی استخوان در کودکان و بزرگسالان می شود. ویتامین D همچنین در تنظیم خود ایمنی، عملکرد متابولیک و پیشگیری از سرطان دخیل است.
میزان بالای ویتامین D و کلسیم می تواند به کلسیفیکاسیون و صدمه به اندام ها، به خصوص کلیه ها و عروق خونی منجر شود. این تست، برای تعیین کمبود ویتامین D فرد؛ برای تعیین مناسب بودن سطح مکمل ویتامین D در فرد؛ اگر فرد در حال درمان با ویتامین D است؛ اگر فرد سطح کلسیم، فسفر، و/ یا هورمون پاراتیروئید غیرطبیعی دارد، در صورتی که فرد شواهدی از بیماری های استخوان یا ضعف استخوان دارد، اگر پزشک مشکوک است که بیمار ممکن است کمبود ویتامین D داشته باشد، یا برای پایش درمان کمبود ویتامین D درخواست می شود. این آزمایش برای زنانی که در معرض خطر بالایی از کمبود ویتامین D قرار دارند (زنان مسن، زنان با سوء جذب، زنان محصور در خانه و زنان با پوست تیره) توصیه می شود. اگر مقدار کلسیم بالا است، یا فرد بیماریی دارد که ممکن است مقادیر بیش از حد ویتامین D تولید کند، نظیر سارکوئیدوز یا برخی از اشکال لنفوم، معمولا ١،٢۵-دی هیدروکسی ویتامین D درخواست می شود. به ندرت، وقتی پزشک مشکوک به اختلالات ١ – آلفاهیدروکسیلاز می باشد، ممکن است این آزمایش را درخواست نماید.